免疫调节功能改变可引发前列腺炎

Ⅲ 型前列腺炎（chronic prostatitis ／ chronicpelvic pain syndromes， CP ／ CPPS）是前列腺炎中最常见的类型，其发病机制复杂。维生素D 是一种具有多种生物效应的激素类载体， 参与细胞免疫功能调节， 其是通过维生素D 受体（vitamin Dreceptor， VDR）发挥生理作用的。VDR 基因启动子上存在Fok Ⅰ 位点单核苷酸多态性（singlenucleotide polymorphism，SNP），是目前发现的唯一影响VDR 氨基酸结构的多态性位点。本研究主要探讨VDR 基因FokⅠ位点SNP 与Ⅲ 型前列腺炎发生的关系。

1 对象与方法

1．1 研究对象采用病例对照研究。收集2009 年8 月至2010 年7 月在本院治疗的Ⅲ型前列腺炎患者103 例为A 组，以《中国泌尿外科疾病诊断治疗指南》（2009 版）为诊断标准，年龄25 ～ 39 岁。同时收集100 例非前列腺疾病患者为B 组， 均为男性， 年龄20 ～ 40 岁。两组年龄差异无统计学意义（P ＞ 0．05）。所有研究对象均为汉族。两组患者既往均无前列腺炎病史，无诱发Ⅲ型前列腺炎的相关职业暴露。本研究经本院伦理委员会批准，参试者均

签署知情同意书。

1．2 方法

1．2．1 DNA 的提取抽取研究对象肘静脉血2mL，采用TIANamp Genomic DNA Kit 试剂盒（深圳晶美）提取基因组。

1．2．2 PCR-RFLP 分析多态性通过GenBank 检索到VDR 基因序列［gi：29745161］，

Genefisher 设计引物： 上游5′ACTGACTCTGGCTCTGAC3′ ； 下游5′ CACCTTGCTTCTTCTCCC 3′， 引物合成由深圳晶美公司完成。PCR 反应体系：反应总体积为50 μL，含2 μL 模板DNA， 8 μL 上、下游引物，2 μL dNTPs，0．7μL Taq DNA 聚合酶和相应的缓冲液。反应条件为：预变性96℃ 8 min， 94℃ 45 s，52℃ 60 s，72℃ 30 s，共40个循环。72℃延伸10 min。取10 μL PCR 产物加入限制性内切酶FokⅠ （深圳晶美）0．5 μL 及10 × buffer 1μL，牛血清白蛋白1 μL，DNA 7．5 μL，总反应体系20μL，37℃酶切，2％的琼脂糖凝胶对酶切产物电泳，自动凝胶成像仪成像，检测基因型。

1．3 统计学方法用直接计算法计算两组患者的基因型和等位基因频率， 两组间VDR 基因型分布以及等位基因的频率差异用χ2 检验。所有数据采用SPSS 17．0 统计软件分析。P ＜ 0．05 说明差异有统计学意义。

2 结果

2．1 VDR 基因FokⅠ多态性以及等位基因在两组中的分布ff 基因型在A 组为41％（42 ／ 103），B 组为34％（34 ／ 100），该基因型在两组间的分布差异有统计学意义（P ＜ 0． 05），而FF 和Ff 基因型的分布在两组之间的差异无统计学意义（P ＞0．05）。F 基因频率在A 组为44％（90 ／ 206）， 与B 组相比差异无统计学意义（P ＞ 0．05），而f 基因频率在A 组为56％

（116 ／ 206）与B 组差异有统计学意义（P ＜ 0．05）。

3 讨论

CP ／ CPPS 是目前临床上最常见的前列腺炎。其病因学十分复杂。有学者认为其可能是一种免疫炎症性疾病［3］。免疫反应异常可能是其发生的一种

原因。

维生素D 及其受体在钙磷代谢中起着重要作用，同时具有免疫调节作用。目前已经发现的VDR基因上存在的与炎症性疾病发生有关的基因多态性位点有BsmⅠ﹑TaqⅠ﹑FokⅠ等酶切位点， 其中FokⅠ 位于启动子上［4－5］，启动子结构的改变对基因的表达会产生调节作用。在大多数的免疫器官和免疫细胞中均存在VDR 的表达。这也是其发挥免疫调节作用的基础。

国内学者张东涛等研究发现，HLA-DQA1 不同等位基因频率与类风湿性关节炎的易感性不同。倪莉等通过对CYP27B1 启动子（－1260，C ／ A）基因多态性与桥本甲状腺炎的研究发现，C 为易感基因位点，而A 可能是桥本抗原保护基因。李升等认为VDR 基因上的BsmⅠ和ApaⅠ位点多态性与广泛性侵袭性牙周炎无相关性，但需进行不同种族以及更大样本量的分析。

本研究通过PCR-RFLP 方法检测了VDR 基因启动子上存在的FokⅠ基因SNP 与CP ／ CPPS 发生之间的关系。发现A 组中ff 基因型例数高于B 组，差异有统计学意义， 说明ff 基因型与CP ／ CPPS 的发生有一定的关系，FokⅠ 多态性可能通过影响VDR 基因转录活性，从而影响其的免疫调节功能，进而导致CP ／ CPPS 的发生。但具体的分子生物学机制尚需行进一步研究。