免疫调节功能改变可引发前列腺炎

Ⅲ型前列腺炎（chronicprostatitis／chronicpelvicpainsyndromes，CP／CPPS）是前列腺炎中最常见的类型，其发病机制复杂。维生素D是一种具有多种生物效应的激素类载体，参与细胞免疫功能调节，其是通过维生素D受体（vitaminDreceptor，VDR）发挥生理作用的。VDR基因启动子上存在FokⅠ位点单核苷酸多态性（singlenucleotidepolymorphism，SNP），是目前发现的唯一影响VDR氨基酸结构的多态性位点。本研究主要探讨VDR基因FokⅠ位点SNP与Ⅲ型前列腺炎发生的关系。

1对象与方法

1．1研究对象采用病例对照研究。收集2009年8月至2010年7月在本院治疗的Ⅲ型前列腺炎患者103例为A组，以《中国泌尿外科疾病诊断治疗指南》（2009版）为诊断标准，年龄25～39岁。同时收集100例非前列腺疾病患者为B组，均为男性，年龄20～40岁。两组年龄差异无统计学意义（P＞0．05）。所有研究对象均为汉族。两组患者既往均无前列腺炎病史，无诱发Ⅲ型前列腺炎的相关职业暴露。本研究经本院伦理委员会批准，参试者均

签署知情同意书。

1．2方法

1．2．1DNA的提取抽取研究对象肘静脉血2mL，采用TIANamp GenomicDNAKit试剂盒（深圳晶美）提取基因组。

1．2．2PCR-RFLP分析多态性通过GenBank检索到VDR基因序列［gi：29745161］，

Genefisher设计引物：上游5′ACTGACTCTGGCTCTGAC3′；下游5′CACCTTGCTTCTTCTCCC3′，引物合成由深圳晶美公司完成。PCR反应体系：反应总体积为50μL，含2μL模板DNA，8μL上、下游引物，2μLdNTPs，0．7μLTaqDNA聚合酶和相应的缓冲液。反应条件为：预变性96℃8min，94℃45s，52℃60s，72℃30s，共40个循环。72℃延伸10min。取10μLPCR产物加入限制性内切酶FokⅠ（深圳晶美）0．5μL及10×buffer1μL，牛血清白蛋白1μL，DNA7．5μL，总反应体系20μL，37℃酶切，2％的琼脂糖凝胶对酶切产物电泳，自动凝胶成像仪成像，检测基因型。

1．3统计学方法用直接计算法计算两组患者的基因型和等位基因频率，两组间VDR基因型分布以及等位基因的频率差异用χ2检验。所有数据采用SPSS17．0统计软件分析。P＜0．05说明差异有统计学意义。

2结果

2．1VDR基因FokⅠ多态性以及等位基因在两组中的分布ff基因型在A组为41％（42／103），B组为34％（34／100），该基因型在两组间的分布差异有统计学意义（P＜0．05），而FF和Ff基因型的分布在两组之间的差异无统计学意义（P＞0．05）。F基因频率在A组为44％（90／206），与B组相比差异无统计学意义（P＞0．05），而f基因频率在A组为56％

（116／206）与B组差异有统计学意义（P＜0．05）。

3讨论

CP／CPPS是目前临床上最常见的前列腺炎。其病因学十分复杂。有学者认为其可能是一种免疫炎症性疾病［3］。免疫反应异常可能是其发生的一种

原因。

维生素D及其受体在钙磷代谢中起着重要作用，同时具有免疫调节作用。目前已经发现的VDR基因上存在的与炎症性疾病发生有关的基因多态性位点有BsmⅠ﹑TaqⅠ﹑FokⅠ等酶切位点，其中FokⅠ位于启动子上［4－5］，启动子结构的改变对基因的表达会产生调节作用。在大多数的免疫器官和免疫细胞中均存在VDR的表达。这也是其发挥免疫调节作用的基础。

国内学者张东涛等研究发现，HLA-DQA1不同等位基因频率与类风湿性关节炎的易感性不同。倪莉等通过对CYP27B1启动子（－1260，C／A）基因多态性与桥本甲状腺炎的研究发现，C为易感基因位点，而A可能是桥本抗原保护基因。李升等认为VDR基因上的BsmⅠ和ApaⅠ位点多态性与广泛性侵袭性牙周炎无相关性，但需进行不同种族以及更大样本量的分析。

本研究通过PCR-RFLP方法检测了VDR基因启动子上存在的FokⅠ基因SNP与CP／CPPS发生之间的关系。发现A组中ff基因型例数高于B组，差异有统计学意义，说明ff基因型与CP／CPPS的发生有一定的关系，FokⅠ多态性可能通过影响VDR基因转录活性，从而影响其的免疫调节功能，进而导致CP／CPPS的发生。但具体的分子生物学机制尚需行进一步研究。