硝基四氮唑蓝法主要用于检测中性粒细胞的吞噬功能和细胞内杀菌能力。该方法通过还原反应显色判断细胞氧化代谢活性,常用于临床感染性疾病、慢性肉芽肿病等免疫缺陷疾病的辅助诊断。
硝基四氮唑蓝法的检测原理基于中性粒细胞在吞噬过程中产生的超氧阴离子。当中性粒细胞发挥正常吞噬功能时,细胞内还原型辅酶Ⅱ氧化酶系统被激活,将无色的硝基四氮唑蓝还原为蓝紫色的甲臜颗粒。通过显微镜观察或分光光度计测定甲臜生成量,可定量评估中性粒细胞的氧化爆发能力。该方法操作简便,结果直观,适用于实验室常规检测。
硝基四氮唑蓝法在临床中主要应用于两类情况。对于反复发生细菌或真菌感染的患儿,该检测有助于筛查慢性肉芽肿病等原发性免疫缺陷病。在成人患者中,则多用于评估败血症、糖尿病合并感染等继发性免疫功能异常。部分自身免疫性疾病如系统性红斑狼疮活动期,也可能出现硝基四氮唑蓝还原率异常。检测时需注意,某些药物如糖皮质激素可能抑制中性粒细胞功能,导致假阴性结果。
进行硝基四氮唑蓝试验前应空腹采血,避免脂血干扰测定。实验室需严格控制反应温度和时间,通常选用37度水浴孵育15分钟。检测结果需结合临床表现和其他免疫指标综合判断,必要时重复检测或进行基因检测验证。对于疑似慢性肉芽肿病患者,建议进一步做二氢罗丹明123流式细胞术检测以明确诊断。