间接荧光抗体试验如何测精子抗体

发布于 2024-01-15 16:38

将已知抗原与第一抗体结合后，再与经异硫氰酸荧光素标记的第二抗体结合后，在荧光显微镜下，可见绿色荧光，从而判定患者血清中是否存在抗精子抗体。

0.01mol/LpH7.4磷酸缓冲液。

甲醇。

羊抗人IgG-FITC。

取正常男性精液，自然液化。

PBS离心洗涤3次，往除精浆，调精子浓度为5104/mL。

精子悬液涂片，室温自然干燥。

甲醇固定10min。

滴加待检血清、阳性血清、阴性血清，37℃湿盒30min。

PBS洗3次，每次浸洗3min。

滴加羊抗人IgG-FITC，37℃湿盒30min。

PBS洗3次后，荧光镜下观察结果。

荧光镜下观察，精子头部、中段出现荧光为抗精子抗体阳性

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