诊断尖锐湿疣的五种方法
发布时间:2010-11-05 18:18:52 复禾健康
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近两年尖锐湿疣的发病率在我国呈居高不下的趋势,那么这时了解尖锐湿疣的诊断方法对于我们来说就显得至关重要了,下面我们就来具体的介绍一下吧!
尖锐湿疣的诊断——基因诊断
(一)标本的采集及处理
1.标本的采集和预处理:用刮板或生理盐水浸润的棉棒从阴道和宫颈外口取分泌物和细胞。在作细胞学检查的同时,将标本放入5ml含有0.05%硫柳汞的PBS中,用PBS离心(3000g,10min)洗涤2次,沉积细胞重悬于1mlPBS中,取0.5ml细胞悬液抽提。
(二)PCR扩增
1.引物设计和合成:HPV基因组可分为早期区(E)和晚期区(L),每区含一系列开放读码框架(ORF)。序列分析表明,各型HPV的非编码区及E1、E6、E7和L1区均有保守序列。Manos等从HPVL1区中选择保守序列设计合成引物MY11和MY09见表1,该引物与HPV6、11、16、18及33型有互补序列,也可扩增其它型。
(三)扩增产物的检测和分析
1.凝胶电泳:扩增反应结束后,取出反应管,冷却至室温,取10μl扩增产物用5%-7%聚丙烯酰胺凝胶或1.5%琼脂糖电泳,溴化乙锭染色,紫外分析仪下分析结果,分子量约为450bp处出现明显的DNA带。
2.核酸杂交:如果凝胶电泳无清楚的DNA或需确定DNA带的特异性时,可用标记的公用混合探针和(或)型特异探针作Southern吸印杂交、斑点杂交验证。
上述这些就是关于尖锐湿疣的诊断方法做出的具体的介绍了,大家都了解了吗?专家提示:对于尖锐湿疣这个性病我们一定要做到早发现早治疗!以免会传染给其它人!
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