内分泌检查的最佳时间通常建议在月经周期的第2-5天进行，此时激素水平最稳定，结果更具参考价值。具体检查时间需根据检查项目、个体症状及医生建议综合决定。
对于女性性激素六项检查，月经周期第2-5天是卵泡早期，此时促卵泡生成素、促黄体生成素、雌二醇等基础水平能准确反映卵巢功能。若需评估黄体功能，则需在月经前1周检测孕酮。甲状腺功能检查通常无须特定时间，但需保持空腹。肾上腺激素检测建议在早晨8-10点进行，此时皮质醇处于峰值。糖尿病患者进行胰岛素释放试验需严格遵医嘱安排时间，通常与糖耐量试验同步。
备孕人群建议在孕前3-6个月完成内分泌评估，包括甲状腺、血糖及性激素检测。青春期发育异常者需结合骨龄检测选择时机。更年期女性出现潮热、失眠等症状时可随时检查，但需避开激素替代治疗期间。特殊项目如生长激素激发试验需在清晨空腹状态下进行，抗缪勒管激素检查则不受月经周期影响。
检查前3天应避免剧烈运动、饮酒及激素类药物干扰。穿着宽松衣物方便抽血，携带既往检查报告供医生对比。长期服用避孕药或激素制剂者需提前告知医生，必要时停药后再检查。若发现激素异常，需在1-3个月后复查确认。