淋巴细胞分离液离心后通常分为三层，从上至下依次为血浆层、淋巴细胞层和红细胞层。淋巴细胞分离液是一种密度梯度离心介质，通过离心作用将血液中的不同成分按密度差异分离。
离心后的最上层为血浆层，主要包含血浆蛋白、水分及其他可溶性物质，呈现淡黄色透明状。中间层为淋巴细胞层，含有单核细胞和淋巴细胞，呈白色云雾状薄层，这是实验需要提取的目标成分。最下层为红细胞层，包含红细胞和粒细胞，呈现深红色沉淀状。部分分离液可能在红细胞层下方形成少量粒细胞沉淀层。离心过程中分离液的密度梯度设计是关键，需严格控制离心速度和时间以确保分层效果。不同品牌分离液的密度范围略有差异，但分层原理一致。
使用淋巴细胞分离液时需注意无菌操作，避免反复冻融影响分离效果。离心后吸取淋巴细胞层应缓慢轻柔，避免混入其他杂质层。分离后的淋巴细胞可用于免疫学研究、细胞培养或临床检测等用途。若分层不清晰可能是血液样本存放过久、离心参数不当或分离液失效导致，建议更换新鲜样本或调整实验条件。